精品无人区无码乱码毛片国产,青青草视频在线视频免费,久久老司机精品网站福利,摸学妹乳房做爱在线观看

歡迎進(jìn)入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站!
13482402338
技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  技術(shù)文章  -  293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA培養(yǎng)步驟

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA培養(yǎng)步驟

更新時(shí)間:2024-03-20點(diǎn)擊次數(shù):1222

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA培養(yǎng)步驟:

一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。每天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過(guò)80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。

三、細(xì)胞凍存:(注:無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法

1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃


TEL:021-61210612

掃碼加微信

美女穴穴戳鸡吧在线观看| 九九99久久精品国产麻豆| 欧美成人免费不卡在线观看| 78精品国产综合久久香蕉| 精密机械一区二区三区天堂| 日本jav一区二区三区| 老熟女国产精品久久久久久| 8x8x精品网| 一本一道久久a久久无码| 天堂SV在线最新版在线| 日韩美女后入一级黄色片| 在线观看无码av五月花| av诱惑在线观看一区二区| 性色国产成人久久久精品| 亚洲国产99热最新在线| 亚洲一区欧美二区日韩一区| 精品中文字幕版在线播放| 日本视频在线一区二区三区| 美女污骚逼喷水白虎白浆| 欧美精品人区一区二区3| 亚洲一区二区三区毛带片| 亚洲天堂2020在线观看| 久久国产欧美另类久久久| 中黑女人群交zzz另类| 日韩欧美亚洲在线观看视频| 阴茎插进女子阴道的视频| 久久久久久 亚洲 激情| 最近更新中文字幕手机版| 黑色丝袜无码中中文字幕| 黄片色片在线看| 中文字幕大香视频蕉无码| 在线看日本天堂日韩一区| 精品欧美一区二区不卡视频| 美女直播全婐APP免费| 操烂你的逼直播网站视频| 久久久中国一级毛片夜色| 男人日女人逼视频免费看| 日韩综合网一区二区三区| 特大鸡吧操美女小逼大片| 亚洲国产成人毛片做暖暖| 女高中生被校长调教高h|